LBEst – MicroScale Thermophoresis (MST)

MicroScale Thermophoresis (MST)

Laboratório de Bioquímica no Grupo de Biofísica e Biologia Estrutural – IFSC – USP – Área 2

Comitê Gestor:

  • Prof. Dr. Glaucius Oliva
  • Profa. Dra. Leila Maria Beltramini
  • Prof. Dr. Rafael V. C. Guido

Equipamento

O equipamento NanoTemper Monolith NT.115 utiliza o princípio da termoforese em microescala (MST) para identificação e quantificação de interações biomoleculares. Basicamente, o equipamento mede a movimentação de moléculas ao longo de gradientes microscópicos de temperatura e detecta mudanças em suas camadas de hidratação, carga e tamanho. Dessa forma ele se torna uma ferramenta extremamente versátil, oferendo medidas precisas de interação (Kd) numa ampla faixa de afinidades (pM até mM) e massas moleculares (desde íons até grandes complexos protéicos). É possível obter medidas de afinidades de proteína-proteína, proteína-pequena molécula, proteína-DNA/RNA, por exemplo.

Missão

Disponibilizar um equipamento capaz de quantificar de interações biomoleculares para qualquer pesquisador interessado em obter medidas de afinidades entre proteína-proteína, proteína-pequena molécula e proteína-DNA/RNA.

Características

Determinação precisa de interação (Kd) numa ampla faixa de afinidades (pM até mM) e massas moleculares (desde íons até grandes complexos protéicos).

Plano de Gestão e Uso:

– O equipamento MicroScale Thermophoresis (MST) será instalado no Laboratório de Bioquímica no Grupo de Biofísica Molecular.

– As despesas com consumíveis serão custeadas pelo usuário, o custo aproximado é de US$ 5,00 por capilar, para utilização do MicroScale Thermophoresis.

– Usuários que tenham interesse em utilizar os equipamentos, sejam do IFSC ou de qualquer outra instituição, deverão submeter ao comitê gestor, via e-mail gryphon_mals@ifsc.usp.br, formulário obtido no seguinte link: Formulário Proposta de Uso. Neste formulário deverão ser fornecidas as características das amostras (peso molecular, concentração, pureza, estado de oligomerização, tampão, Gel de SDS da purificação, concentração de sal e outros aditivos etc.) dentro de um plano de trabalho conciso contendo os principais objetivos do projeto. Um equipamento de Dynamic Light Scatering (DLS) está disponível para uma caracterização da amostra. Sugerimos fortemente uma consulta previa para que seja fornecido um auxílio para a sugestão de tampões adequados para a preparação da amostra. O pedido será analisado pelo comitê gestor, que pode negar o acesso caso haja problemas com a amostra da proteína.

– O agendamento será mensal, priorizando-se os Projetos Associados e Complementares desta solicitação.

– A eventual cobrança de taxas de serviços será feita através de uma das fundações associadas a USP São Carlos, sendo que taxas diferenciadas para as solicitações provenientes de fora da Área acadêmica e externos ao IFSC/USP podem ser aplicadas.

Referências

Os trabalhos a serem publicados, bem como teses, dissertações e monografias deverão mencionar o uso do Equipamento Multi-Usuário (EMU/FAPESP) / CIBFar / Grupo de Cristalografia / IFSC.